ชุด ForeDirect RT-qPCR
คำอธิบายชุด:
◮สำหรับการขยาย RNA แบบเรียลไทม์โดยตรงจากการเก็บตัวอย่างโดยไม่ต้องผ่านกระบวนการทำให้บริสุทธิ์ RNAชุดนี้ทำให้วงจร qRT-PCR เสร็จสิ้นภายในหนึ่งชั่วโมงส่วนผสมของเอนไซม์เป็นการผสมผสานที่ลงตัวของ Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA polymerase, RNase inhibitorบัฟเฟอร์ปฏิกิริยาประกอบด้วยส่วนประกอบที่จำเป็นทั้งหมด รวมถึงส่วนประกอบบัฟเฟอร์ที่ปรับให้เหมาะสม Mg2+, dUTP และ dNTP
คำอธิบาย
ForeDirect RT-qPCR Kit ได้รับการออกแบบมาสำหรับการขยายสัญญาณ RNA ตามเวลาจริงโดยตรงจากการเก็บตัวอย่างโดยไม่ต้องผ่านกระบวนการทำให้บริสุทธิ์ RNAชุดนี้ทำให้วงจร qRT-PCR เสร็จสิ้นภายในหนึ่งชั่วโมงส่วนผสมของเอนไซม์เป็นการผสมผสานที่ลงตัวของ Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA polymerase, RNase inhibitorบัฟเฟอร์ปฏิกิริยาประกอบด้วยส่วนประกอบที่จำเป็นทั้งหมด รวมถึงส่วนประกอบบัฟเฟอร์ที่ปรับให้เหมาะสม Mg2+, dUTP และ dNTP
ข้อมูลจำเพาะ
100T
ส่วนประกอบของชุด
| สารปลดปล่อยกรดนิวคลีอิก |
| สารป้องกัน RNA |
| 2× บัฟเฟอร์ RT-qPCR |
| ส่วนผสมของเอนไซม์ (Taq&M-MLV) |
| คำแนะนำ |
แอปพลิเคชันพีซีอาร์
1. เมื่อหลอดปฏิกิริยา PCR ถูกหมุนเหวี่ยงเป็นเวลาสั้นๆ ให้ใส่ลงในถังตัวอย่างของเครื่องมือขยายสัญญาณ
2. โปรโตคอลความร้อน
| ขั้นตอนที่ | อุณหภูมิ | เวลา | รอบ | |
| 1 | การถอดความแบบย้อนกลับ | 50 ℃ | 15 นาที | 1 |
| 2 | ก่อนการเสียสภาพธรรมชาติ | 95 ℃ | 1 นาที | 1 |
| 3 | การเสียสภาพธรรมชาติ | 95 ℃ | 10 วินาที | 42 |
| 4 | หลอม/ขยาย | 60 ℃ | 30 วินาที | |
บันทึก:ตรวจพบสัญญาณฟลูออเรสเซนต์ทันทีหลังจากขั้นตอนการขยายของแต่ละรอบ
3. หลังจากตั้งค่าแล้ว ให้บันทึกไฟล์และเรียกใช้โปรแกรมตอบสนอง
ขั้นตอนการดำเนินงาน
ก่อนการเตรียมรีเอเจนต์ ควรละลายรีเอเจนต์ทั้งหมดในชุดที่อุณหภูมิห้องและผสมอย่างเบามือ
การเตรียมรีเอเจนต์
1. เตรียมส่วนผสมที่ปลดปล่อยกรดนิวคลีอิก
| ส่วนประกอบ | ปริมาณต่อตัวอย่างหรือการควบคุม |
| สารปลดปล่อยกรดนิวคลีอิก | 5μL |
| สารป้องกัน RNA | 0.5 ไมโครลิตร |
2. เตรียมปฏิกิริยาผสม
| ส่วนประกอบ | ปริมาณต่อตัวอย่างหรือการควบคุม |
| 2× บัฟเฟอร์ RT-qPCR | 15 ไมโครลิตร |
| ส่วนผสมของเอนไซม์ (Taq&M-MLV) | 1.5 ไมโครลิตร |
| ไพรเมอร์และโพรบ | 1μL |
การจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา
-ควรเก็บชุดอุปกรณ์ไว้ที่ -20± 5℃.ระยะเวลาที่ถูกต้องคือ 12 เดือน
-หลีกเลี่ยงรอบการแช่แข็ง-ละลายซ้ำ (<5 รอบ)
