Animal Tissue Direct PCR kit-UNG (ไม่มีเครื่องมือสุ่มตัวอย่าง) Protocol
คำอธิบาย
ชุดนี้ใช้ระบบบัฟเฟอร์สลายเฉพาะเพื่อปลดปล่อย DNA จีโนมอย่างรวดเร็วจากตัวอย่างเนื้อเยื่อสัตว์สำหรับปฏิกิริยา PCR ดังนั้นจึงเหมาะอย่างยิ่งสำหรับการทดสอบทางพันธุกรรมในปริมาณมาก
กระบวนการปลดปล่อย DNA จีโนมจากบัฟเฟอร์การสลายจะเสร็จสิ้นภายใน 10-30 นาทีที่อุณหภูมิ 65°Cไม่จำเป็นต้องมีกระบวนการอื่นๆ เช่น การกำจัดโปรตีนและ RNA และ DNA ร่องรอยที่ปล่อยออกมาสามารถใช้เป็นแม่แบบสำหรับปฏิกิริยา PCR
2×PCR ง่ายTMMix (UNG) ใช้ dUTP แทน dTTP บนพื้นฐานของ 2×PCR EasyTMผสมและเติมเอนไซม์ UNG (Uracil-N-glycosylase) ที่สามารถย่อยสลายแม่แบบที่มี dUTP ได้ในเวลาเดียวกันก่อนเกิดปฏิกิริยา PCR เอนไซม์ UNG จะถูกใช้เพื่อย่อยสลายผลิตภัณฑ์ PCR ที่มียูราซิลเอนไซม์ UNG จะไม่มีผลใดๆ ต่อแม่แบบที่ไม่มียูราซิล ดังนั้นจึงรับประกันความจำเพาะและความแม่นยำของการขยายและป้องกันความเป็นไปได้ของการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์ PCR ในระหว่างการทดสอบทางพันธุกรรมขนาดใหญ่
D-Taq DNA polymerase เป็น DNA polymerase ที่พัฒนาเป็นพิเศษโดย Foregene สำหรับปฏิกิริยา PCR โดยตรงD-Taq DNA polymerase มีความทนทานสูงต่อสารยับยั้งปฏิกิริยา PCR หลายชนิด และสามารถขยายปริมาณ DNA ในระบบปฏิกิริยาที่ซับซ้อนต่างๆ ได้อย่างมีประสิทธิภาพ และความเร็วในการขยายสามารถเข้าถึง 2Kb/นาที ซึ่งเหมาะอย่างยิ่งสำหรับปฏิกิริยา Direct PCR
ส่วนประกอบของชุด
ส่วนที่ 1 | บัฟเฟอร์อัล |
Foregene โปรตีเอส | |
บัฟเฟอร์การโหลด DNA 6 × | |
ส่วนที่ 2 | 2×PCR ง่ายTMผสม (UNG) |
คุณสมบัติและข้อดี
■ไม่มีการทำให้บริสุทธิ์ของ DNA ที่ใช้เวลานานและมีราคาแพง
■ ความต้องการตัวอย่างมีน้อย สามารถทดสอบเนื้อเยื่อสัตว์ได้เพียง 5 มก.
■ ไม่จำเป็นต้องมีการดูแลเป็นพิเศษ เช่น การบดและการบด และการใช้งานง่าย
■ ระบบ PCR ที่ปรับให้เหมาะสมทำให้ PCR มีความจำเพาะสูงขึ้นและทนทานต่อสารยับยั้งปฏิกิริยา PCR ได้ดีขึ้น
■ ระบบ PCR ป้องกันมลพิษ2×พีซีอาร์ง่ายTMMix (UNG) กำจัดมลพิษที่เกิดจากผลิตภัณฑ์ PCR ได้อย่างมีประสิทธิภาพ และรับประกันความจำเพาะและความแม่นยำของการขยายสัญญาณ
ชุดพารามิเตอร์
การประยุกต์ใช้: เนื้อเยื่อสัตว์ต่างๆ
DNA ออกจากการสลายตัวอย่าง: ใช้เป็นแม่แบบ PCR เท่านั้น
สามารถใช้ชุดเครื่องมือนี้เพื่อวัตถุประสงค์ต่อไปนี้: การระบุการดัดแปลงพันธุกรรม การสืบพันธุ์ของสัตว์ ฯลฯ
เวิร์กโฟลว์
การจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา
ส่วน I ของชุดนี้ควรเก็บไว้ที่ 2-8℃.
รีเอเจนต์ Buffer AL สามารถเก็บไว้ได้นาน 12 เดือนภายใต้สภาวะแห้งสามารถเก็บได้ที่ 2-8℃เพื่อการจัดเก็บที่ยาวนานขึ้น
รีเอเจนต์ Foregene Protease มีสูตรเฉพาะเพื่อให้แน่ใจว่ากิจกรรมและความเสถียร โปรดเก็บไว้ที่ 4℃เป็นเวลา 12 เดือน
น้ำยา6×สามารถเก็บ DNA Loading Buffer ได้ที่ 4℃หรือ -20℃เป็นเวลานาน.
ส่วนที่สองของชุดนี้ควรเก็บไว้ที่ -20℃.
น้ำยา2×พีซีอาร์ง่ายTMMix(UNG) ถ้าใช้บ่อยก็เก็บไว้ที่ 4 ได้เช่นกัน℃เพื่อการเก็บรักษาระยะสั้น (ใช้ให้หมดภายใน 10 วัน)