QuickEasyᵀᴹ Kit-Taqman PCR แบบเรียลไทม์
คำอธิบาย
QuickEasy 2 เท่าTMReal PCR Mix-Taqman จัดทำโดย QuickEasyTMชุด Real Time PCR Kit-Taqman เป็นระบบมาสเตอร์มิกซ์เจเนอเรชันใหม่ที่ออกแบบมาสำหรับปฏิกิริยาการขยายสัญญาณ PCR แบบเรียลไทม์โดยใช้โพรบเรืองแสงเฉพาะForegene HS Taq DNA Polymerase แกนหลักของมันขึ้นอยู่กับการดัดแปลงแอนติบอดี ซึ่งใช้ร่วมกับระบบ PCR ที่ได้รับการปรับปรุงเพิ่มเติมของ Foregene มีความจำเพาะเจาะจงและประสิทธิภาพการขยายที่สูงขึ้นเมื่อเทียบกับการผสม PCR ทั่วไป มีความสามารถในการขยายสัญญาณที่แรงกว่าและอัตราการไม่ตรงกันที่ต่ำกว่าสามารถใช้ในปฏิกิริยา PCR เชิงปริมาณเรืองแสงเพื่อลดการขยายที่ไม่เฉพาะเจาะจงและปรับปรุงความแม่นยำของ PCRสามารถปรับปรุงความจำเพาะของผลิตภัณฑ์และความไวต่อปฏิกิริยาได้อย่างมากในเวลาเดียวกัน ROX ถูกจัดให้เป็นสีย้อมอ้างอิงภายใน
ควิกอีซี่TMชุดเครื่องมือ PCR แบบเรียลไทม์-Taqman มีขอบเขตการใช้งานที่กว้างขวางกับจำนวนเทมเพลต และสามารถรับเส้นโค้งมาตรฐานที่ดีในภูมิภาคเชิงปริมาณที่แตกต่างกัน และสามารถหาปริมาณและตรวจจับยีนเป้าหมายได้อย่างแม่นยำด้วยความสามารถในการทำซ้ำที่ดีและมีความมั่นใจสูง
ข้อมูลจำเพาะ
200 เตรียม500 เตรียม1,000 เตรียม2000 เตรียม
ส่วนประกอบของชุด
ควิกอีซี่TMชุด PCR-Taqman แบบเรียลไทม์(20ไมโครลิตรระบบ) | ||||
เนื้อหาชุด | คิวพี-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
เตรียม 200 | 500 เตรียม | เตรียม 1,000 | 2000 เตรียม | |
2×เร็วง่ายTM PCR จริง ผสม-แท็คแมน | 1 มล×2 | 1.7 มล×3 | 1.7 มล×6 | 1.7 มล×12 |
20×ROX อ้างอิงสีย้อม | 200ไมโครลิตร | 0.5 มล | 1 มล | 1 มล×2 |
ddH ที่ปราศจาก DNase2O | 1.7 มล | 1.7 มล×2 | 10 มล | 20 มล |
ถ้าคุณ | 1ชิ้นส่วน | 1ชิ้นส่วน | 1ชิ้นส่วน | 1ชิ้นส่วน |
คุณสมบัติและข้อดี
■ ระบบเพิ่มประสิทธิภาพ PCR ที่ไม่เหมือนใครทำให้ 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman เข้ากันได้มากขึ้น
■ Hot-start Foregene HS Taq Polymerase มีประสิทธิภาพการขยายที่สูงขึ้น ความไวในการขยายที่สูงขึ้น และความจำเพาะในการขยายที่สูงขึ้น
■ 2× ควิกอีซี่TM Real PCR Mix -Taqman ใช้ระบบเฉพาะที่ปรับให้เหมาะสมโดย Foregene เพื่อปรับปรุงความไวและความจำเพาะของการตรวจจับโพรบเฉพาะลำดับ ซึ่งสามารถใช้สำหรับการกำหนดจีโนไทป์และการกำหนดความผันแปรของจำนวนสำเนา และรับผลลัพธ์ที่แม่นยำ
■ ผลิตภัณฑ์นี้มาพร้อมกับสีย้อมอ้างอิงภายใน ROX ซึ่งสามารถใช้เพื่อขจัดพื้นหลังของสัญญาณและข้อผิดพลาดของสัญญาณระหว่างหลุม ซึ่งสะดวกสำหรับลูกค้าในการใช้เครื่องมือ PCR เชิงปริมาณประเภทต่างๆ
แอปพลิเคชันชุด
■ PCR เชิงปริมาณเรืองแสงสำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณแม่แบบ;
■ ซีการขยาย PCR แบบดั้งเดิม;
■ สามารถใช้สำหรับการตรวจจับอัลลีล.
การจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา
ควรเก็บชุดอุปกรณ์ไว้ที่อุณหภูมิ -20°C ในที่มืดหากใช้บ่อยสามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4°C เป็นระยะเวลาสั้นๆ (ใช้ให้หมดภายใน 10 วัน)
หลักการออกแบบไพรเมอร์แบบเรียลไทม์ PCR
ไพรเมอร์ไปข้างหน้าและไพรเมอร์ย้อนกลับ
สำหรับ Real Time PCR การออกแบบไพรเมอร์มีความสำคัญมากไพรเมอร์เกี่ยวข้องกับความจำเพาะและประสิทธิภาพของการขยาย PCR และสามารถออกแบบโดยอ้างอิงถึงหลักการต่อไปนี้:
ความยาวรองพื้น: 18-30bp.
เนื้อหา GC: 40-60%
ค่า Tm: ซอฟต์แวร์ออกแบบ Primer เช่น Primer 5 สามารถให้ค่า Tm ของ Primer ได้ค่า Tm ของไพรเมอร์อัพสตรีมและดาวน์สตรีมควรใกล้เคียงกันมากที่สุดนอกจากนี้ยังสามารถใช้สูตรการคำนวณ Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T)เมื่อดำเนินการ PCR โดยทั่วไปจะเลือกอุณหภูมิที่ต่ำกว่าค่าไพรเมอร์ Tm ที่ 5 °C เป็นอุณหภูมิการหลอม (การเพิ่มอุณหภูมิการหลอมที่สอดคล้องกันสามารถเพิ่มความจำเพาะของปฏิกิริยา PCR)
ผลิตภัณฑ์รองพื้นและ PCR:
การออกแบบไพรเมอร์ PCR ความยาวของผลิตภัณฑ์ขยายควรอยู่ที่ 100-150bp
ไพรเมอร์การออกแบบในพื้นที่โครงสร้างรองของแม่แบบควรหลีกเลี่ยงให้มากที่สุด
หลีกเลี่ยงการก่อตัวของฐานเสริม 2 ฐานขึ้นไประหว่างปลาย 3 ′ของไพรเมอร์ต้นน้ำและปลายน้ำ
ฐานเทอร์มินัล Primer 3 'ไม่สามารถมี G หรือ C ติดต่อกันได้อีก 3 อัน
ไพรเมอร์เองไม่สามารถมีโครงสร้างเสริมกันได้ มิฉะนั้น จะเกิดโครงสร้างกิ๊บซึ่งส่งผลต่อการขยาย PCR
ควรกระจาย ATCG ให้เท่า ๆ กันในลำดับไพรเมอร์และควรหลีกเลี่ยงฐานเทอร์มินัล 3 'เป็น T
ภาคผนวก 1:ชุดเสริมส่วนประกอบ Cell Direct RT-qPCR Kit
1.โซลูชั่นสลายเซลล์
| |||
ส่วนประกอบของชุด (ระบบสลาย 24 หลุม / หลุม) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 ต | 500 ต | ||
ส่วนหนึ่งฉัน | บัฟเฟอร์ CL | 20 มล | 100 มล |
ฟอร์จีน โปรตีเอส พลัส II | 400 มล | 1 มล. × 2 | |
บัฟเฟอร์ ST | 1 มล. × 2 | 10 มล | |
ส่วนหนึ่งครั้งที่สอง | ยางลบดีเอ็นเอ | 400 มล | 1 มล. × 2 |
2.RT ผสม
| |
ส่วนประกอบของชุด (ระบบปฏิกิริยา 20 ไมโครลิตร) | DRT-01011-B1 |
200 ต | |
5× ผสม RT โดยตรง | 800 มล |
RNase ฟรี ddH2O | 1.7 มล. × 2 |
| ||
ส่วนประกอบของชุด (ระบบปฏิกิริยา 20 ไมโครลิตร) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 ต | 1,000 ต | |
2× โดยตรง qPCR Mix-SYBR | 1 มล. × 2 | 1.7 มล. × 6 |
50× ROX สีย้อมอ้างอิง | 40 มล | 200 มล |
RNase ฟรี ddH2O | 1.7 มล | 10 มล |