Lnc-RT Heroᵀᴹ I (ด้วย gDNase) (Super Premix สำหรับการสังเคราะห์ cDNA สายแรกจาก lncRNA)
ข้อมูลจำเพาะ
25×20μl Rxns, 50×20μล. Rxns
Lnc-RT HeroTM I (ด้วย gDNase) เป็นระบบการถอดรหัสแบบย้อนกลับที่พัฒนาขึ้นเป็นพิเศษสำหรับ lncRNA เพื่อกำจัดการปนเปื้อนของจีโนมดีเอ็นเออย่างรวดเร็ว5×gDNase Mix สามารถกำจัดจีโนมที่เหลืออยู่ใน RNA ได้อย่างรวดเร็วที่อุณหภูมิ 42°C เป็นเวลา 2 นาที หลีกเลี่ยงการรบกวนของจีโนมในผลลัพธ์ qPCR ได้อย่างมีประสิทธิภาพ
5×L-RT HeroTM Mix ประกอบด้วย Foregene LncRNA Reverse Transcriptase ที่พัฒนาเป็นพิเศษโดย Foregene ซึ่งเป็น Reverse transcriptase ชนิดใหม่โดยเฉพาะสำหรับ lncRNA และเทมเพลต RNA ที่ซับซ้อนแบบยาวอื่นๆ โดยมีความสัมพันธ์ RNA ที่แข็งแกร่งและมีประสิทธิภาพการบันทึกการย้อนกลับที่สูงขึ้นระบบที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมนี้ทำให้อัตราการถอดความย้อนกลับเร็วขึ้น และสามารถถอดความเทมเพลต RNA ที่มีเนื้อหา GC สูงและโครงสร้างรองที่ซับซ้อนได้อย่างง่ายดายการสังเคราะห์ cDNA สายแรกสามารถทำได้ที่ 42°C ในเวลา 15 นาที
ส่วนประกอบของชุด
| 5× gDNase ผสม |
| 5× L-RT HeroTM ผสม |
| ddH2O ที่ปราศจาก RNase |
| คำแนะนำ |
คุณสมบัติและข้อดี
■ความสามารถในการลบ gDNA ที่มีประสิทธิภาพ ซึ่งสามารถลบ gDNA ในเทมเพลตได้ภายใน 2 นาที
■ สามารถย้อนกลับการถอดความของ lncRNA ได้อย่างมีประสิทธิภาพเมื่อผลิตภัณฑ์การถอดรหัสแบบย้อนกลับอยู่ภายใต้ qPCR ค่า Ct จะต่ำกว่าค่าของระบบการถอดรหัสแบบย้อนกลับทั่วไป
■ ระบบการถอดรหัสแบบย้อนกลับที่มีประสิทธิภาพ ใช้เวลาเพียง 15 นาทีในการสังเคราะห์ cDNA สายแรกให้เสร็จสมบูรณ์
■ เทมเพลตที่ซับซ้อน: เทมเพลตที่มีเนื้อหา GC สูงและโครงสร้างรองที่ซับซ้อนสามารถย้อนกลับได้ด้วยประสิทธิภาพสูง
■ ระบบการถอดรหัสย้อนกลับความไวสูง เทมเพลตระดับ pg ยังสามารถรับ cDNA คุณภาพสูงได้อีกด้วย
■ ระบบการถอดรหัสแบบย้อนกลับมีเสถียรภาพทางความร้อนสูง อุณหภูมิปฏิกิริยาที่เหมาะสมคือ 42℃และยังมีประสิทธิภาพการถอดความย้อนกลับที่ดีที่ 50℃.
แอปพลิเคชันชุด
lncRNA การวิเคราะห์เชิงปริมาณสัมพัทธ์
lncRNA การวิเคราะห์เชิงปริมาณสัมบูรณ์
สามารถวิเคราะห์ Trace RNA เช่น RNA Virus ได้อย่างรวดเร็วและแม่นยำ
การถอดความแบบย้อนกลับของเทมเพลต RNA ที่มีเนื้อหา GC สูงหรือโครงสร้างรองที่ซับซ้อน
เวิร์กโฟลว์
การจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา
ควรเก็บชุดอุปกรณ์ไว้ที่ -20°ค. เก็บผลิตภัณฑ์ไว้ในตู้เย็นอุณหภูมิคงที่ -20°C ทันทีที่ได้รับหากสภาวะการเก็บรักษาเหมาะสม ผลิตภัณฑ์จะไม่ทำให้ประสิทธิภาพการทำงานลดลงในช่วงระยะเวลา 1 ปี
คู่มือวิเคราะห์ปัญหา
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-การขยายเสียงเฉพาะ
1. การออกแบบไพรเมอร์ที่ไม่สมเหตุสมผล
คำแนะนำ: ออกแบบสีรองพื้นตามหลักการออกแบบสีรองพื้น
2. จีโนมตกค้าง
คำแนะนำ: ตรวจสอบให้แน่ใจว่าอุณหภูมิของปฏิกิริยาการกำจัด gDNA ในขั้นตอนแรกคือ 42°C และยังสามารถขยายเวลาปฏิกิริยาเป็น 5 นาที
ไม่มีการขยายสัญญาณโดย RT-qPCR
1. RNA ถูกย่อยสลาย
คำแนะนำ: วัสดุสำหรับการสกัด RNA ควรมีความสดใหม่ที่สุดเท่าที่จะเป็นไปได้ และควรใช้ RNA ที่มีคุณภาพสูงและมีความบริสุทธิ์สูง
2. RNA มีสารยับยั้ง
คำแนะนำ: สารยับยั้งการถอดความแบบย้อนกลับโดยทั่วไปประกอบด้วย SDS, เกลือกัวนิดีน, EDTA เป็นต้น แนะนำให้ล้าง RNA ที่ตกตะกอนด้วยเอทานอล 70% เพื่อกำจัดสารยับยั้ง
3. ปัญหาการออกแบบรองพื้น
คำแนะนำ: ตามหลักการออกแบบสีรองพื้น ให้ออกแบบสีรองพื้นใหม่สำหรับการตรวจสอบ
แถบเป้าหมายปรากฏในตัวควบคุมที่ว่างเปล่า
1. การปนเปื้อนของเครื่องมือปฏิบัติงานหรือน้ำยา
คำแนะนำ: น้ำยาหรืออุปกรณ์ทั้งหมดสำหรับการทดลองควรนึ่งฆ่าเชื้อระมัดระวังและนุ่มนวลในการจัดการเพื่อป้องกันไม่ให้ตัวอย่าง DNA ถูกดูดเข้าไปในปิเปตหรือหกออกจากท่อหมุนเหวี่ยง
2. การปนเปื้อนเกิดขึ้นระหว่างการเตรียมระบบปฏิกิริยา PCR
คำแนะนำ: ใช้ความระมัดระวังที่จำเป็นในการจัดการ เช่น: สวมถุงมือยาง ใช้ปลายตัวกรองใช้ Real Time PCR Mix ในระบบป้องกันการปนเปื้อน
3. ไพรเมอร์เสื่อมสภาพ
คำแนะนำ: ใช้ SDS-PAGE อิเล็กโตรโฟรีซิสเพื่อตรวจสอบว่าไพรเมอร์เสื่อมสภาพหรือไม่ และแทนที่ด้วยไพรเมอร์ใหม่สำหรับการทดลองตรวจจับการเรืองแสง
คู่มือการใช้งาน:
