EndoFree Maxi Plasmid Kit (คอลัมน์สปิน)
คำอธิบาย
ชุด EndoFree Maxi Plasmid ใช้เทคนิคการดูดซับเมมเบรนซิลิกาที่ไม่เหมือนใครเพื่อจับพลาสมิด DNA ได้อย่างมีประสิทธิภาพและเฉพาะเจาะจงด้วยการรวม Endotoxin Removal Buffer P4 แบบพิเศษและ EndoFree Maxi Filtration Columns ทำให้สามารถขจัดสารพิษ Endotoxin โปรตีน และสิ่งสกปรกอื่นๆ ได้อย่างมีประสิทธิภาพกระบวนการสกัดทั้งหมดใช้เวลาเพียง 1 ชั่วโมง จึงมั่นใจได้ถึงการทำงานที่สะดวกและรวดเร็ว
ปริมาณแบคทีเรียที่แนะนำสำหรับการปฏิบัติแต่ละครั้ง: สำหรับพลาสมิดที่มีสำเนาสูง ขอแนะนำให้ใช้อาหารเพาะเลี้ยงแบคทีเรีย 100 มล. และผลผลิตโดยทั่วไปประมาณ 500-1500 ไมโครกรัมสำหรับพลาสมิดที่มีสำเนาต่ำ แนะนำให้ใช้อาหารเพาะเลี้ยงแบคทีเรียขนาด 200 มล. เพื่อสร้างพลาสมิดประมาณ 200-600 ไมโครกรัม
ส่วนประกอบของชุด
ผลิตภัณฑ์ ส่วนประกอบ | D909-E(เตรียม 10 ครั้ง) |
บัฟเฟอร์ BL | 30 มล |
บัฟเฟอร์ P1 | 100 มล |
บัฟเฟอร์ P2 | 100 มล |
บัฟเฟอร์ P4 | 100 มล |
บัฟเฟอร์ DW2 | 44 มล |
บัฟเฟอร์ EB | 30 มล |
RNase A(10 มก./มล.) | 1 มล |
คอลัมน์ DNAPure Maxi Spin | 10 ชิ้น |
ไซริงค์กรอง FinePure Maxi | 10 ชิ้น |
หลอดเก็บ 50 มล | 10 ชิ้น |
การตรวจจับความเข้มข้นและความบริสุทธิ์ของพลาสมิดดีเอ็นเอ
ความบริสุทธิ์และความเข้มข้นของพลาสมิดดีเอ็นเอที่สกัดได้สามารถตรวจจับได้ด้วย agarose gel electrophoresis และ ultraviolet spectrophotometerค่า OD260 1 สอดคล้องกับประมาณ 50 ไมโครกรัม/มิลลิลิตรของ DNA สายคู่ค่า OD260/OD280 ของ DNA พลาสมิดบริสุทธิ์โดยทั่วไปจะอยู่ในช่วง 1.7-1.9DNA ของพลาสมิดที่บริสุทธิ์สามารถนำไปใช้โดยตรงกับการทดลองที่ต้องการความบริสุทธิ์สูง เช่น การถ่ายเซลล์หรือการทดลองในร่างกาย
แอปพลิเคชันชุด
DNA ของพลาสมิดที่สกัดโดยชุดอุปกรณ์นี้สามารถนำไปใช้กับการทำงานตามปกติต่างๆ รวมถึงการย่อยด้วยเอนไซม์, PCR, การหาลำดับ, ligation, การเปลี่ยนแปลง ตลอดจนการถ่ายเซลล์สำหรับเซลล์ประเภทต่างๆ
การจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา
EndoFree Maxi Plasmid Kit สามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง (15-25°C) ภายใต้สภาวะแห้งได้นานถึง 12 เดือนเติม RNase A ลงในบัฟเฟอร์ P1 ก่อนใช้งานครั้งแรก ผสมให้เข้ากันและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 2-8°Cส่วนผสมสามารถเก็บไว้ได้อย่างเสถียรนานกว่า 6 เดือน