องค์กรยังคงรักษาแนวคิดของขั้นตอน "การจัดการทางวิทยาศาสตร์ คุณภาพและประสิทธิภาพสูงสุด ผู้ซื้อสูงสุดสำหรับผู้ผลิตจีนสำหรับพรีมิกซ์เข้มข้น 2 เท่าสำหรับตัวอย่างที่ไม่บริสุทธิ์ PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U ธุรกิจของเราทุ่มเทเพื่อให้บริการลูกค้าด้วยผลิตภัณฑ์คุณภาพสูงที่มีนัยสำคัญและปลอดภัยในราคาที่เหมาะสม ทำให้ลูกค้าทุกคนพอใจกับบริการของเรา
องค์กรยังคงรักษาแนวคิดของขั้นตอน "การจัดการทางวิทยาศาสตร์ คุณภาพและประสิทธิภาพสูงสุด ผู้ซื้อสูงสุดสำหรับChina Taq DNA Polymerase และ Qpcrบริษัทของเรามีความแข็งแกร่งและมีระบบเครือข่ายการขายที่มั่นคงและสมบูรณ์แบบเราหวังว่าเราจะสามารถสร้างความสัมพันธ์ทางธุรกิจที่ดีกับลูกค้าทั้งหมดจากในประเทศและต่างประเทศบนพื้นฐานของผลประโยชน์ร่วมกัน
หลักการออกแบบไพรเมอร์แบบเรียลไทม์ PCR

ไพรเมอร์ไปข้างหน้าและไพรเมอร์ย้อนกลับ

สำหรับ Real Time PCR การออกแบบไพรเมอร์มีความสำคัญมากไพรเมอร์เกี่ยวข้องกับความจำเพาะและประสิทธิภาพของการขยาย PCR และสามารถออกแบบโดยอ้างอิงถึงหลักการต่อไปนี้:

• ความยาวรองพื้น: 18-30bp.
• เนื้อหา GC: 40-60%
• ค่า Tm: ซอฟต์แวร์ออกแบบ Primer เช่น Primer 5 สามารถให้ค่า Tm ของ Primer ได้ค่า Tm ของไพรเมอร์อัพสตรีมและดาวน์สตรีมควรใกล้เคียงกันมากที่สุดนอกจากนี้ยังสามารถใช้สูตรการคำนวณ Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T)เมื่อดำเนินการ PCR โดยทั่วไปจะเลือกอุณหภูมิที่ต่ำกว่าค่าไพรเมอร์ Tm ที่ 5 °C เป็นอุณหภูมิการหลอม (การเพิ่มอุณหภูมิการหลอมที่สอดคล้องกันสามารถเพิ่มความจำเพาะของปฏิกิริยา PCR)
• ผลิตภัณฑ์รองพื้นและ PCR:

1. การออกแบบไพรเมอร์ PCR ความยาวของผลิตภัณฑ์ขยายควรอยู่ที่ 100-150bp
2. ไพรเมอร์การออกแบบในพื้นที่โครงสร้างรองของแม่แบบควรหลีกเลี่ยงให้มากที่สุด
3. หลีกเลี่ยงการก่อตัวของฐานเสริม 2 ฐานขึ้นไประหว่างปลาย 3 ′ของไพรเมอร์ต้นน้ำและปลายน้ำ
4. ฐานเทอร์มินัล Primer 3 'ไม่สามารถมี G หรือ C ติดต่อกันได้อีก 3 อัน
5. ไพรเมอร์เองไม่สามารถมีโครงสร้างเสริมกันได้ มิฉะนั้น จะเกิดโครงสร้างกิ๊บซึ่งส่งผลต่อการขยาย PCR
6. ควรกระจาย ATCG ให้เท่า ๆ กันในลำดับไพรเมอร์และควรหลีกเลี่ยงฐานเทอร์มินัล 3 'เป็น T

ภาคผนวก1：คell โดยตรงRT-qPCR ชุดส่วนประกอบt แพ็คเสริม

1. โซลูชั่นสลายเซลล์

 องค์กรยังคงรักษาแนวคิดของขั้นตอน "การจัดการทางวิทยาศาสตร์ คุณภาพและประสิทธิภาพสูงสุด ผู้ซื้อสูงสุดสำหรับผู้ผลิตจีนสำหรับพรีมิกซ์เข้มข้น 2 เท่าสำหรับตัวอย่างที่ไม่บริสุทธิ์ PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U ธุรกิจของเราทุ่มเทเพื่อให้บริการลูกค้าด้วยผลิตภัณฑ์คุณภาพสูงที่มีนัยสำคัญและปลอดภัยในราคาที่เหมาะสม ทำให้ลูกค้าทุกคนพอใจกับบริการของเรา
ผู้ผลิตจีนสำหรับChina Taq DNA Polymerase และ Qpcrบริษัทของเรามีความแข็งแกร่งและมีระบบเครือข่ายการขายที่มั่นคงและสมบูรณ์แบบเราหวังว่าเราจะสามารถสร้างความสัมพันธ์ทางธุรกิจที่ดีกับลูกค้าทั้งหมดจากในประเทศและต่างประเทศบนพื้นฐานของผลประโยชน์ร่วมกัน

หลักการออกแบบไพรเมอร์แบบเรียลไทม์ PCR

ไพรเมอร์ไปข้างหน้าและไพรเมอร์ย้อนกลับ

สำหรับ Real Time PCR การออกแบบไพรเมอร์มีความสำคัญมากไพรเมอร์เกี่ยวข้องกับความจำเพาะและประสิทธิภาพของการขยาย PCR และสามารถออกแบบโดยอ้างอิงถึงหลักการต่อไปนี้:

• ความยาวรองพื้น: 18-30bp.
• เนื้อหา GC: 40-60%
• ค่า Tm: ซอฟต์แวร์ออกแบบ Primer เช่น Primer 5 สามารถให้ค่า Tm ของ Primer ได้ค่า Tm ของไพรเมอร์อัพสตรีมและดาวน์สตรีมควรใกล้เคียงกันมากที่สุดนอกจากนี้ยังสามารถใช้สูตรการคำนวณ Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T)เมื่อดำเนินการ PCR โดยทั่วไปจะเลือกอุณหภูมิที่ต่ำกว่าค่าไพรเมอร์ Tm ที่ 5 °C เป็นอุณหภูมิการหลอม (การเพิ่มอุณหภูมิการหลอมที่สอดคล้องกันสามารถเพิ่มความจำเพาะของปฏิกิริยา PCR)
• ผลิตภัณฑ์รองพื้นและ PCR:

1. การออกแบบไพรเมอร์ PCR ความยาวของผลิตภัณฑ์ขยายควรอยู่ที่ 100-150bp
2. ไพรเมอร์การออกแบบในพื้นที่โครงสร้างรองของแม่แบบควรหลีกเลี่ยงให้มากที่สุด
3. หลีกเลี่ยงการก่อตัวของฐานเสริม 2 ฐานขึ้นไประหว่างปลาย 3 ′ของไพรเมอร์ต้นน้ำและปลายน้ำ
4. ฐานเทอร์มินัล Primer 3 'ไม่สามารถมี G หรือ C ติดต่อกันได้อีก 3 อัน
5. ไพรเมอร์เองไม่สามารถมีโครงสร้างเสริมกันได้ มิฉะนั้น จะเกิดโครงสร้างกิ๊บซึ่งส่งผลต่อการขยาย PCR
6. ควรกระจาย ATCG ให้เท่า ๆ กันในลำดับไพรเมอร์และควรหลีกเลี่ยงฐานเทอร์มินัล 3 'เป็น T

ภาคผนวก1：คell โดยตรงRT-qPCR ชุดส่วนประกอบt แพ็คเสริม

1. โซลูชั่นสลายเซลล์

คู่มือการใช้งาน:

 Quick Easy Cell Direct RT-qPCR Kit-Taqman