การแนะนำ:

โมเลกุล RNA สามารถโต้ตอบอย่างกว้างขวางกับโมเลกุลทางชีวภาพอื่นๆ เช่น โปรตีน, DNA และ RNA ดังนั้นจึงมีอยู่ในเซลล์และสิ่งมีชีวิตในรูปของสารเชิงซ้อนระดับโมเลกุลขนาดใหญ่ในหมู่พวกเขา RNA-โปรตีนคอมเพล็กซ์คือการมีอยู่และหน้าที่ของ RNA หนึ่งในรูปแบบที่สำคัญของการดึง RNA เป็นวิธีคลาสสิกในการคัดกรองและระบุโมเลกุล RNA โดยเฉพาะอย่างยิ่งโปรตีนที่มีปฏิสัมพันธ์ของโมเลกุล lncRNA และได้รับการยอมรับจากนักวิจัยส่วนใหญ่และวารสารวิชาการระหว่างประเทศที่เชื่อถือได้วันนี้ FORREGENE จะแบ่งปันหลักการทดลองและกระบวนการทางเทคนิคของ RNA แบบดึงลงให้คุณฟัง บางทีคุณอาจใช้มันได้

1. หลักการทดลองของเทคโนโลยีดึง RNA:

การถอดรหัสและการสังเคราะห์ในหลอดทดลองของ lncRNA เป้าหมายที่ติดฉลากไบโอตินหรือชิ้นส่วน lncRNA (รวมถึงชิ้นส่วน RNA ที่ใช้เป็นตัวควบคุมเชิงบวกและเชิงลบ) และฟักตัวด้วยสารสกัดจากเซลล์ใช้เม็ดแม่เหล็กยึดกับอะวิดินเพื่อรวบรวม RNA-โปรตีน หรือ RNA-RNA คอมเพล็กซ์ หลังจากการล้างอย่างละเอียด คอมเพล็กซ์จะถูกชะออกหากตรวจพบโมเลกุลเป้าหมายของโปรตีนที่ทำปฏิกิริยากับ lncRNA ให้ดำเนินการอิเล็กโตรโฟรีซิสของโปรตีนบนผลิตภัณฑ์ RNA-pull down ตรวจจับโปรตีนเป้าหมายด้วยการย้อมสีเงิน และตัดเจลสำหรับแมสสเปกโตรเมตรียังดำเนินการตรวจสอบ blot แบบตะวันตกโดยตรงกับผลิตภัณฑ์แบบเลื่อนลงหากตรวจพบ สำหรับโมเลกุลเป้าหมาย RNA ที่โต้ตอบกับ lncRNA ผลิตภัณฑ์ RNA-pull down จะต้องทำการสกัด RNA และทำการตรวจจับ qRT-PCR ที่เฉพาะเจาะจง

2. ขั้นตอนการทดลองเทคโนโลยี RNA แบบดึงลง:

3. บริการด้านเทคนิคสำหรับการดึง RNA ของ FOREGENE:

การเพาะเลี้ยงเซลล์

การเตรียมสารสกัดโปรตีนรวมของเซลล์/นิวเคลียร์/พลาสมา

การทดลองดึง RNA

อิเล็กโตรโฟรีซิส SDS-PAGE คราบสีเงิน

แมสสเปกโทรเมทรีและการทดลอง WB

รายงานการทดลอง

4. กรณีทดลอง

รูปต่อไปนี้แสดงผลของการดึง RNA ของ FJ Bio-Bio และการตรวจจับ SDS-PAGE อิเล็กโตรโฟรีซิส ซึ่งลูกศรสีแดงทำเครื่องหมายแถบความแตกต่าง:

กลุ่มวิจัยของศาสตราจารย์ซ่ง สวี แห่งมหาวิทยาลัยเสฉวนได้สั่งสมมายาวนานถึง 15 ปีในด้านการวิจัย lncRNAForegene Bio และกลุ่มวิจัยของศาสตราจารย์ Song Xu ร่วมมือกันเพื่อเปิดตัวเทคโนโลยีดึง RNA ของ lncRNA ซึ่งจะให้ผลลัพธ์ที่น่าพอใจสำหรับการทดลองของคุณ