การสร้างระบบ SOP

จัดทำ SOP การทดลอง PCR เพื่อสร้างมาตรฐานพฤติกรรมของบุคลากรในการทดลอง

ผู้ทดลองปฏิบัติตามขั้นตอนการปฏิบัติงานอย่างเคร่งครัด และลดมลพิษ PCR ที่อาจเกิดจากปัจจัยมนุษย์หรือป้องกันการเกิดมลพิษในการปฏิบัติงานนอกจากนี้ ผู้ทดลองควรมีความรู้และทักษะทางวิชาชีพที่สอดคล้องกัน รวมถึงความชำนาญในการใช้งานอุปกรณ์ที่เกี่ยวข้อง ชี้แจงขั้นตอนการทำงานทั้งหมด เชี่ยวชาญวิธีการบำบัดสิ่งปนเปื้อนและวิธีการควบคุมคุณภาพห้องปฏิบัติการ และสามารถตีความผลการทดสอบได้อย่างถูกต้อง

สร้างห้องปฏิบัติการ PCR มาตรฐาน

ห้องปฏิบัติการ PCR แบ่งออกเป็นสี่ส่วนตามหลักการ ได้แก่ พื้นที่เตรียมรีเอเจนต์ พื้นที่ประมวลผลตัวอย่าง พื้นที่ขยาย และพื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์ขยายพื้นที่สองส่วนแรกเป็นพื้นที่ก่อนการขยายสัญญาณ และสองพื้นที่สุดท้ายเป็นพื้นที่หลังการขยายสัญญาณควรแยกโซนก่อนขยายและโซนหลังขยายออกจากกันอย่างเคร่งครัดวัสดุทดลอง รีเอเจนต์ กระดาษบันทึก ปากกา วัสดุทำความสะอาด ฯลฯ สามารถไหลจากพื้นที่ก่อนขยายไปยังพื้นที่หลังขยายเท่านั้น กล่าวคือ จากพื้นที่เตรียมรีเอเจนต์ พื้นที่ประมวลผลตัวอย่าง พื้นที่ขยาย และพื้นที่วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์ขยายเสียง และต้องไม่ไหลย้อนกลับการไหลของอากาศในห้องปฏิบัติการควรไหลจากพื้นที่ก่อนการขยายไปยังพื้นที่หลังการขยาย ไม่ใช่ในทิศทางย้อนกลับ

ลดขั้นตอนการทดลอง

หากห้องปฏิบัติการดำเนินการตรวจหาและระบุ PCR เท่านั้น ขอแนะนำให้ใช้ PCR เชิงปริมาณเรืองแสงแทน PCR ทั่วไป

ผลการตรวจจับ PCR เชิงปริมาณของฟลูออเรสเซนซ์สามารถรวบรวมและวิเคราะห์ได้ด้วยสัญญาณฟลูออเรสเซนต์ ดังนั้นจึงไม่จำเป็นต้องเปิดฝาสำหรับอิเล็กโตรโฟรีซิสหลังปฏิกิริยา ซึ่งจะช่วยหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์ PCR ที่เกิดจากการรั่วไหลของผลิตภัณฑ์ที่ทำปฏิกิริยาเพื่อสร้างละอองลอยหากคุณเพิ่มจำนวนของช่องเปิดในระหว่างขั้นตอนการโหลดเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส อาจเกิดการปนเปื้อนของละอองลอยได้ขอแนะนำให้ส่งเสริมการประยุกต์ใช้ PCR เชิงปริมาณและค่อยๆ แทนที่ PCR เชิงคุณภาพ

ใช้ระบบป้องกันมลพิษ UNG

ระบบป้องกันการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์ UNG anti-PCR ใช้สำหรับปฏิกิริยา PCR

ระบบใช้ dUTP แทน dTTPหลังจากปฏิกิริยา PCR ผลิตภัณฑ์ PCR ทั้งหมด (ชิ้นส่วน DNA) จะรวมเข้ากับ dUTPในรอบถัดไปของปฏิกิริยา PCR เอ็นไซม์ UNG ที่เติมเข้าไปในระบบจะถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 5 นาทีก่อน PCR ซึ่งสามารถจำเพาะเจาะจง ย่อยสลายชิ้นส่วน DNA ทั้งหมดที่มี dUTP แล้วจึงทำปฏิกิริยา PCRสิ่งนี้สามารถกำจัดการปนเปื้อนของละอองลอยที่เกิดจากผลิตภัณฑ์ PCR ได้อย่างสมบูรณ์ผลกระทบจะแสดงในรูปด้านล่าง:

หมายเหตุ: สำหรับชุดผลิตภัณฑ์ PCR โดยตรง คุณสามารถเลือกชุดผลิตภัณฑ์ของระบบมลพิษผลิตภัณฑ์ต่อต้าน PCR ของ FJ Biotech

แนะนำ

สำหรับห้องปฏิบัติการที่ทำการทดสอบจีโนไทป์ขนาดใหญ่ ขอแนะนำให้ใช้ระบบการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์ UNG anti-PCR สำหรับการทดสอบรีเอเจนต์นอกเหนือจากการสร้างห้องปฏิบัติการที่เหมาะสม

คำเตือน: การใช้ระบบนี้ไม่สามารถกำจัดการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์ PCR ที่เกิดขึ้นแล้วได้ดังนั้น ควรใช้ระบบ UNG ในช่วงเริ่มต้นของการทดสอบที่เกี่ยวข้อง และควรใช้ระบบ UNG สำหรับการขยาย PCR เสมอ เพื่อป้องกันการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์ PCRบวกเท็จ

ขอแนะนำให้ใช้ระบบ Direct PCR-UNG ของ Forge Biotech เมื่อดำเนินการทดสอบขนาดใหญ่ เช่น: Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG；

ชุด PCR โดยตรงสำหรับเมล็ดพันธุ์พืช-UNG；

ชุด PCR โดยตรงจากเนื้อเยื่อสัตว์-UNG；

Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG；

Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG 。

ชุดเครื่องมือชุดนี้จาก Foregene ไม่เพียงแต่สามารถตรวจจับ PCR ได้อย่างรวดเร็วและในปริมาณมากเท่านั้น แต่ยังป้องกันและควบคุมการปนเปื้อนของผลิตภัณฑ์ PCR ได้อย่างมีประสิทธิภาพอีกด้วย