คุณยังใช้ Trizol เพื่อแยก RNA อยู่หรือไม่?
เอ้ย อย่าให้ฉันต้องเป็นห่วงเรื่องสุขภาพของคุณ!
Trizol กำลังจะถูกลดบทบาท อย่าบอกนะว่ายังมืดมนอยู่?

ส่วนประกอบหลักของรีเอเจนต์ Trizol คือฟีนอล และสารรีเอเจนต์อินทรีย์ เช่น คลอโรฟอร์ม จะถูกเพิ่มเข้าไปในการทดลองด้วยการสัมผัสเป็นเวลานานจะก่อให้เกิดอันตรายต่อสุขภาพของคุณ โดยเฉพาะการสัมผัสทางผิวหนังโดยตรงอาจทำให้เกิดแผลไหม้จากสารเคมีอย่างรุนแรงและเกิดแผลเป็นถาวรได้

ภายใต้สถานการณ์ปกติ ผู้ร่วมห้องปฏิบัติการสามารถลดอันตรายได้ด้วยการติดอาวุธครบมือเท่านั้น (สวมเสื้อกาวน์ ถุงมือ และหน้ากาก)

และคำแนะนำของฉันสำหรับคุณคือ: โปรดเปลี่ยน Trizol โดยตรงเพื่อหลีกเลี่ยงอันตรายจากแหล่งที่มา

1. ผลิตภัณฑ์รุ่นแรกของการสกัด RNA
ออกมาในปี 1987 (น้ำยา Trizol)

ข้อได้เปรียบ:
การสกัดที่สมบูรณ์ยิ่งขึ้น

ข้อเสีย:
จำเป็นต้องใช้รีเอเจนต์ที่เป็นพิษ เช่น กัวนิดีน ไอโซไทโอไซยาเนต-ฟีนอล-คลอโรฟอร์ม
การดำเนินการที่ยุ่งยาก
จำเป็นต้องใช้ DNase เพื่อกำจัดการปนเปื้อนของ DNA

2. ผลิตภัณฑ์รุ่นที่สองของการสกัด RNA
ออกมาในปี 1994 (QIAGEN RNeasy และผลิตภัณฑ์ในประเทศส่วนใหญ่)

ข้อได้เปรียบ:
ใช้วิธีหมุนเหวี่ยงคอลัมน์ซึ่งใช้งานง่าย

ข้อเสีย:
จำเป็นต้องหมุนเหวี่ยงเพื่อกำจัดเศษเนื้อเยื่อ
จำเป็นต้องใช้ DNase เพื่อกำจัดการปนเปื้อนของ DNA

3.ผลิตภัณฑ์รุ่นที่สามของการสกัด RNA
ออกฉายในปี 2548 (QIAGEN RNeasy Plus และ Fออริจินอลผลิตภัณฑ์ชุดการทำให้บริสุทธิ์ RNA)

ข้อได้เปรียบ:
ใช้คอลัมน์กำจัด DNA โดยตรงเพื่อกำจัด DNA และเศษเนื้อเยื่อในเวลาเดียวกัน ประหยัดเวลาและความพยายาม
ปลอดภัยและสะดวก ไม่จำเป็นต้องเพิ่มคอลัมน์ตัวกรองและ DNase เพื่อขจัดสิ่งเจือปนและหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนของ DNA ได้อย่างง่ายดาย

มาดูความแตกต่างในการปฏิบัติงานระหว่างผลิตภัณฑ์รุ่นแรก (Trizol) ผลิตภัณฑ์รุ่นที่สอง (RNeasy) และผลิตภัณฑ์รุ่นที่สาม (Foregene) ของการสกัด RNA:

การดำเนินการในรูปนั้นชัดเจน: ผลิตภัณฑ์รุ่นที่สามมีข้อได้เปรียบที่ชัดเจน

แค่สามคำก็อธิบายได้ ง่าย!เร็ว!ความปลอดภัย

แผนภูมิ PK ของผลการทดลองสำหรับผลิตภัณฑ์สกัด RNA รุ่นแรก รุ่นที่สอง และรุ่นที่สาม:

1. Eอิเล็กโทรโฟเรโตแกรม

รุ่นแรก (1: Trizol)
รุ่นที่สอง (2:QIAGEN RNeasy)
รุ่นที่สาม (3: QIAGEN RNeasy บวก 4: Foregene)

สินค้าแบบไหนดีจะได้รู้โดยเปรียบเทียบ
แยก RNA โดยใช้ชุด Foregene
ไม่เพียงแต่มีความเข้มข้นสูงแต่ยังมีความสมบูรณ์ที่ดีอีกด้วย

กราฟ 2.qPCR (กราฟเส้นโค้งการขยาย)

รุ่นแรก (Trizol)

รุ่นที่สอง (สีฟ้าวิธีQIAGEN RNeasy- สีแดงวิธีQIAGEN RNeasy +)

รุ่นที่สาม (สีฟ้าหมายถึง Foregene สีเขียวหมายถึง QIAGEN RNeasy plus)

(หมายเหตุ: QIAGEN RNeasy รุ่นที่สองของกราฟ qPCR หมายความว่าชุดไม่เพิ่ม DNase และไม่กำจัดการปนเปื้อนของ DNA ดังนั้น CT จึงสูงกว่าและผลลัพธ์ไม่ถูกต้อง QIAGEN RNeasy + หมายความว่ามีการเพิ่ม DNase และลบการปนเปื้อนของ DNA และผลลัพธ์นั้นแม่นยำ)

ไม่ว่าจะเป็นกราฟอิเล็กโทรโฟเรโตแกรมหรือกราฟเส้นโค้งการขยายสัญญาณ PCR เชิงปริมาณ คุณภาพของผลิตภัณฑ์ Foregene ก็ไม่ได้ด้อยไปกว่าผลิตภัณฑ์นำเข้าจากต่างประเทศ